Viernes, 21 de septiembre de 2018

SEPTIEMBRE de 2018
Volumen XXXV 
N° 365
ISSN 1852-317X

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abril 2018

Brote de leptospirosis en terneros asociado al serogrupo Canicola.

Vet. Arg. – Vol.  XXXV – Nº 360 – Abril 2018.
Koval, A1., López S.1, Saint Martin, M.1, Lagioia, G.1, Ferreyra, A.1, M., Castillo2, C., Villa, M2.

Resumen
Se describe un brote de leptospirosis ocurrido en terneros en un establecimiento de cría ubicado en la localidad de Pardo, Provincia de Buenos Aires.
En la necropsia se observó ictericia generalizada, riñones hemorrágicos y presencia de orina sanguinolenta en la vejiga.
El brote se controló en forma rápida medicando con oxitetraciclina y vacunando contra leptospirosis  todo el rodeo.
A partir de riñón de un ternero muerto se aisló un microorganismo identificado como Leptospira interrogans perteneciente al serogrupo Canicola.

Summary
An outbreak of leptospirosis in calves is described in a breeding farm located in Pardo, Buenos Aires Province.
Generalized jaundice, haemorrhagic kidneys and presence of bloody urine in the bladder were observed during necropsy.
The outbreak was rapidly controlled with oxitetracycline and vaccination of the herd.
A microorganism isolated from the kidney of 1 dead calf was identified as Leptospira interrogans belonging to the Canicola serogroup.

1-Biogénesis-Bagó S.A. ariel.koval@biogenesisbago.com
2-Med. Vet. asesor actividad privada

Introducción
En Argentina existen varias referencias de brotes de leptospirosis en bovinos, en su mayoría asociados al serovar Pomona. Se han descripto casos en tambos, rodeos de cría y en establecimientos de engorde intensivo (feed lots)1,2,3,4.
Sin embargo, la participación de leptospiras pertenecientes al serogrupo Canicola no es tan frecuente y solamente se registran 2 aislamientos a partir de bovinos en un informe de la Comisión Científica Permanente de Leptospirosis de la Asociación Argentina de Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico (AAVLD). Dicho informe recopila la información de aislamientos de Leptospiras en las diferentes especies animales en Argentina desde aproximadamente el año 1940 hasta el 20005.
El serovar Canicola se asocia con frecuencia con leptospirosis canina y en forma esporádica se  encuentra implicado en brotes en bovinos.
El aislamiento y la tipificación de las cepas de leptospira resulta clave para conocer qué serovares están presentes y así disponer de aislamientos locales virulentos para incluirlos en la formulación a de vacunas que mejoren su eficacia en la prevención de la enfermedad en los animales y así, poder disminuir el riesgo de transmisión al humano.
El caso que se describe tiene una particularidad, debido a que el brote se presentó en concomitancia con una severa deficiencia mineral, causa de muerte de varios terneros,  lo cual planteó un verdadero desafío diagnóstico.
El objetivo de este trabajo es describir el caso resuelto en sus aspectos clínicos, la metodología utilizada para la recuperación e identificación del agente causal y discutir los aspectos relativos al diagnóstico, al manejo y a la vacunación.

Materiales y métodos
Antecedentes y evolución clínica del brote
El brote descripto se presentó en un campo de cría próximo a la localidad de Pardo, partido de Las Flores, Provincia de Buenos Aires.
En un rodeo de 112 vaquillonas de primera parición y con entore a los 15 meses comenzó la muerte de terneros de 1 semana a un mes de vida.
El personal del establecimiento observó terneros decaídos que se cansaban ante un esfuerzo físico. Ante la sospecha de neumonía el mismo personal aplicó oxitetraciclina a 2 terneros con sintomatología, los cuales murieron y esto fue el motivo de la consulta veterinaria.
La profesional actuante efectuó  necropsias encontrando en ambos animales la musculatura pálida, tricobezoares y tierra en el estómago. También detectó pica en otro ternero con síntomas y temperatura normal, el cual murió al día siguiente.
Ante la evidencia de pica y sospecha de una importante deficiencia mineral, se tomaron muestras de sangre a 10 animales para evaluación del perfil mineral, y se administró un suplemento vitamínico mineral a todos los terneros. Durante el encierre en el corral para aplicar el tratamiento murieron 2 terneros más.
El resultado del perfil mineral indicó una deficiencia severa de cobre y selenio, lo que motivó la administración de suplemento vitamínico mineral a las vacas que faltaban parir.
En concomitancia con esta situación se encontraron otros 2 terneros muertos y, en un rodeo vecino con vaquillonas de segunda parición, otro muerto y 2 con síntomas de debilidad que murieron en unas horas.
Se efectuó la necropsia de los terneros muertos y se encontraron riñones hemorrágicos aumentados de tamaño, ictericia evidente y orina sanguinolenta en la vejiga.
Estos hallazgos significativamente diferentes de lo observado en las necropsias anteriores hicieron sospechar leptospirosis.
Al día siguiente se aplicó oxitetraciclina a todos los terneros y se extrajo un riñón de un animal recientemente muerto, el cual se envió refrigerado para intentar confirmar el diagnóstico.
A las 48 horas se administró una segunda dosis de antibiótico y la primera dosis de vacuna, aplicando la segunda dosis a los 20 días.
Al mismo tiempo en el establecimiento se registraron 14 abortos de los cuales no se dispone de la información diagnóstica.

Toma de muestras
Solamente se extrajo un riñón de un animal, remitido con su cápsula intacta y bien refrigerado, en perfecto estado de conservación.

Cultivo
El riñón a procesar se sumergió entre 5 y 10 minutos en un recipiente con alcohol 70 % para reducir la carga microbiana externa.
En cabina de seguridad biológica se retiró del recipiente y se dejó escurrir sobre papel absorbente.
Con pinza de mano izquierda y tijera estériles se procedió a retirar la grasa y la cápsula renal.
Con bisturí estéril  se cortó el riñón en forma transversal. Para obtener material para la siembra se utilizó un rayador artesanal estéril, raspando el tejido renal en toda la superficie de corte.
La acción de raspado genera una pulpa que se acumula en la superficie interna del rayador.
Con espátula estéril se colectó dicho material y se colocó en un tubo con medio  EMJH líquido. Se dejó decantar y con pipeta estéril se tomó 0.5 mL de sobrenadante y se sembró un primer tubo de medio EMJH semisólido con 5 fluorouracilo. A partir de ese primer tubo (dilución 1:10) se realizaron 2 diluciones seriadas en otros 2 tubos del mismo medio de cultivo (1:100 y 1:1000). Los tubos sembrados se incubaron a 28 – 30 º C.

Resultados
Cultivo y aislamiento
A la observación microscópica mediante campo oscuro de los cultivos, en la segunda semana de incubación se verificó la presencia de leptospiras.

Tipificación a nivel de serogrupo
El aislamiento se repicó a medio EMJH líquido para poder efectuar la tipificación por microaglutinación. Pasados 10 días se efectuó la tipificación hasta nivel de serogrupo enfrentando la cepa aislada a sueros de referencia, identificándola como perteneciente al serogrupo Canicola.

Inoculación experimental
El aislamiento se inoculó en 2 hámsters de 60 g de peso para verificar su virulencia en esta especie y los mismos murieron al décimo día post inoculación. La cepa se recuperó a partir de sangre y riñón.

Discusión
Este es el tercer aislamiento reportado en Argentina de L. interrogans serogrupo Canicola a partir de un brote en bovinos.
Además, este caso presenta aspectos interesantes para analizar en forma independiente del aislamiento realizado.
1-Las enfermedades se pueden presentar asociadas y con signología similar.
En el transcurso de una semana se observó mortalidad en terneros  debido a una carencia mineral severa y a una enfermedad infecciosa concomitante, afectando a la misma categoría de animales y con una signología clínica similar: terneros decaídos que murieron a las pocas horas, con un diagnóstico presuntivo de neumonía.
2-La importancia fundamental de una necropsia realizada en tiempo adecuado e interpretada por un profesional.
Una necropsia ejecutada por un profesional con experiencia es irremplazable. En este caso permitió sospechar de una carencia mineral severa e implementar un tratamiento inmediato, mucho antes de que la carencia fuera confirmada por el laboratorio. A su vez, después de aplicado el tratamiento vitamínico mineral, la aparición de nuevos casos y la ejecución de posteriores necropsias permitió sospechar de otra enfermedad absolutamente diferente, instaurar un tratamiento antibiótico precoz, vacunar y seguramente salvar la vida de varios terneros, sin esperar varios días un resultado de laboratorio para tomar decisiones.
3-La aplicación temprana de antibiótico y vacuna resulta altamente efectiva para controlar un brote de leptospirosis.
Existe amplia experiencia en que la aplicación de tratamiento antibiótico y la vacunación al comienzo de un brote de leptospirosis produce resultados contundentes, tanto en casos de mortalidad de terneros como de abortos en vacas 2,3.
4-Qué categorías se deben vacunar y cuándo.
La implementación de la vacunación de las vacas con 2 dosis previamente al servicio debería complementarse con una dosis al realizar el tacto para diagnóstico de preñez. Este plan debería proteger a las vacas contra problemas de infertilidad y abortos y conferir inmunidad a los terneros hasta aproximadamente el tercer mes de vida en el cual descienden los anticuerpos calostrales. Pero este esquema deja una ventana inmunológica en los terneros que se encuentran desprotegidos y vulnerables a la enfermedad a partir de este momento.
Por lo tanto se recomienda la implementación de la vacunación temprana de los terneros con 2 dosis, para prevenir la enfermedad en esta etapa dado que puede causar elevada mortalidad en esta categoría 4.
5-Los costos de un brote de leptospirosis.
Los brotes severos de leptospirosis en un rodeo bovino, con tormentas de abortos de entre 30 y 40 % de los animales gestantes, o muertes de más de 50 novillitos en un feed lot3 indican que esta enfermedad atenta contra la rentabilidad de cualquier tipo de explotación bovina. A esto se debe sumar el costo del tratamiento antibiótico. Además, y no resulta un tema menor, se debe considerar el riesgo potencial de la infección del personal, que puede tener un desenlace fatal 6.
6-La importancia de un diagnóstico confirmatorio.
El diagnóstico presuntivo de carencia mineral y leptospirosis fue confirmado con el apoyo del laboratorio de diagnóstico. Si bien se actuó en forma rápida, sin esperar los resultados, tomando las muestras adecuadas se confirmaron las sospechas. El diagnóstico confirmatorio permite tomar medidas de fondo, como una suplementación mineral preventiva con monitoreo periódico y la inclusión de la vacuna para prevenir leptospirosis dentro del plan sanitario y de manejo del establecimiento.
Se ha descripto un caso donde una enfermedad carencial y una infecciosa se presentan al mismo tiempo afectando a una misma categoría de animales. La primera sospecha de neumonía se pudo descartar a partir de la necropsia. La presencia de tricobezoares y tierra en el cuajo orientaron hacia una carencia mineral. Se produjeron nuevas muertes de terneros pero en la necropsia se observaron signos compatibles con leptospirosis, todo en el trascurso de una semana.
Pese a la complejidad se tomaron las decisiones correctas en forma rápida, basadas en el criterio clínico del profesional veterinario y se remitieron las muestras adecuadas para, con el apoyo del laboratorio, llegar al diagnóstico confirmatorio de las 2 etiologías.

Bibliografía
1-Bardón, J.C., Noseda, R.P., Martínez, A.H., Cordeviola, J.M., Combessies, G.M., Yurno, O.A. 1993. Leptospirosis bovina: aislamiento y tipificación de Leptospira interrogans Serovar Pomona. Resultados serológicos en 2 brotes del partido de Azul, provincia de Buenos Aires, Argentina. Rev. Med. Vet. (Argentina), 74 (2): 70-72.
2-Koval, A., López, S., Nardello, M., Vena, M.M., Margueritte, J.2007. Aislamiento, tipificación y evaluación de la capacidad inmunogénica y de protección cruzada de una cepa de Leptospira interrogans perteneciente al serogrupo Pomona. Vet. Arg. Vol. XXIV. Nº 235.
3-Licoff, N., Koval, A., López, S., Margueritte, J., Mejía, M. 2008. Brote de leptospirosis en feed lot: descripción del caso, confirmación diagnóstica y medidas de control implementadas. Vet. Arg. Vol. XXV. Nº 250: 749-755.
4-Draghi, M.G., Brihuega, B., Benítez, D., Sala, J.M., Biotti, G., Pereyre, M., Homse, A., Guariniello, L. 2011. Brote de leptospirosis en terneros en recría en la provincia de Corrientes, Argentina. Rev. Arg. Microbiol. 43: 42-44.
5-Argento, E., Caminoa, R., Draghi, G., Dorta de Mazzonelli, G., Mazzonelli, J., Seijo, A., Stiebel, C. 2002. Vacunas y Vacunaciones en Leptospirosis. Informe sobre Leptospirosis en la República Argentina. Memorias IIº Congreso Argentino de Zoonosis y Iº Congreso Argentino y Latinoamericano de Enfermedades Emergentes. Buenos Aires.
6-Koval A., López, S., Lagioia, G., Bertino, R., Romera, M., Scialfa, E. 2017. Brote de leptospirosis en bovinos y humanos en un tambo de Lincoln, Provincia de Buenos Aires. Vet . Arg. Vol. XXXIV, Nº 335.