Vet. Arg. – Vol.  XXXV – Nº 368 – Diciembre 2018.
Illanes, F. A.¹; Romero, J. R.¹; Niño Uribe, A. I.^{1, 2}; Pruzzo, C. I.¹
Resumen
En un ensayo de reducción de la población de larvas de Haemonchus contortus en refugio en un establecimiento comercial de la provincia de Corrientes, como paso previo al intento de introducción de una cepa exótica susceptible, se realizaron 5 y 6 tratamientos con monepantel en ovejas y borregas respectivamente, a lo largo del año 2014. Al finalizar el año se detectó una falla en la eficacia de la droga. Por este motivo se realizó una evaluación de la misma mediante un test de reducción de recuento de huevos y posterior test de eficacia controlada por necropsia.
Se tomaron 22 animales de destete (borregas de 25-30 kg), desparasitados con derquantel y abamectina y negativos al control postratamiento. Se esperó la reinfección natural hasta alcanzar una carga parasitaria superior a 1000 HPG promedio.
Los resultados obtenidos confirmaron las sospechas de resistencia, con una eficacia global del 42% en el TRCH, en cuanto a los resultados de necropsia expresan una eficacia total del 70,77%, con valores de 11,25% para Haemonchus contortus y 28,57% para Trichostrongylus colubriformis. En cuanto a Cooperia spp. mantuvo una eficacia del 100.
Se documenta el primer caso de resistencia a monepantel en Argentina y se discute la relativa facilidad de generar resistencia a esta droga.
Palabras clave: Resistencia. Nematodes. Monepantel. Corrientes

 First report of antihelmintic resistance to monepantel^a in sheep of the province of Corrientes, Argentina.
Summary
In a trial of reduction the population of Haemonchus contortus larvae in refuge in a commercial establishment in the province of Corrientes, as a previous step to the attempt of introduction of susceptible exotic strain, were executed 5 and 6 treatments with monepantel on sheep and lamb respectively, during the 2014. By the end of the year a failure in the effectiveness of the drug was detected. For this reason an evaluation of this effectiveness was carried out by an egg count reduction test and a subsequent efficacy test by necropsy.
Twenty-two weaning animals were taken (25-30 kg ewes), dewormed using derquantel and abamectin and negative to post-treatment control. It was waited for the natural reinfection until reaching a parasitic load above 1000 EPG as average.
The results obtained confirmed the suspicious of resistance, with a global effectiveness of 42% in the ECRT, regarding the results of necropsy show an effectiveness of 70.77%, with 11.25% for Haemonchus contortus and 28, 57% for Trichostrongylus colubriformis. As for the Cooperia spp. it was maintained the effectiveness 100%.
It is documented the first case of resistance to monepantel in Argentina and it is discussed the relative case of generating resistance to this drug.
*Zolvix®, Novartis.
¹Facultad de Cs. Veterinarias UNLP – CEDIVE.
²Becario CONICET.

Introducción
En zonas templadas, el parasitismo gastrointestinal con predominio de Haemonchus contortus y Trichostrongylus colubriformis, es un limitante mayor de la producción ovina. El manejo empírico del productor promedio, se centra en el control farmacológico exclusivamente. Esto, inevitablemente en Argentina como en otras regiones, resultó en la aparición de resistencia a los antihelmínticos. Los primeros casos refieren a Haemonchus contortus en la provincia de Buenos Aires frente a bencimidazoles (Entrocasso et al., 1988; Romero et. al., 1993).

En 1994, el 46% de las majadas de Argentina presentaban resistencia a bencimidazoles, 40% a levamisol, 11% a la combinación de ambos y 6% a ivermecina (Eddi  et al., 1996). En 1998 se observaron los primeros casos de resistencia de Haemonchus spp., a closantel en la Mesopotamia y se comprobó la mayor prevalencia de resistencia en esta región, respecto a todas las drogas en uso (Romero et. al., 1998). Para el 2004, en un nuevo relevamiento patrocinado por FAO, la situación siguió empeorando, el 65% de las majadas a nivel nacional presentó resistencia, el 52% a ivermectina, 55% bencimidazoles y 16% a closantel (Caracostantogolo et al., 2005). Observaciones de los autores, en la provincia de Corrientes elevan la resistencia de Haemonchus contortus a closantel a 80% de los establecimientos. Monepantel, introducido en Argentina 2011, era la única droga eficaz frente a cepas de trichostrongylidos ovinos (Anziani et al., 2015). Naftalophos, en la región, solamente se utiliza en Uruguay y derquantel (combinado con abamectina) se introdujo en 2014.

La generalización de casos de resistencia, impone la búsqueda de métodos alternativos de control, como selección de ovinos resistentes, manejo del pastoreo alterno con otras especies y la introducción de cepas susceptibles en establecimientos problema. A partir de una cepa de Haemonchus contortus susceptible aislada en Chascomús por los autores (CEDIVE), caracterizada por Guzmán et al. (2011), y de estudios previos en pequeña escala, se inició un ensayo de sustitución de la cepa en un establecimiento de la provincia de Corrientes. La estrategia fue reducir la población en refugio en base a tratamientos (con drogas eficaces) durante una temporada, previo al momento más desfavorable a los estados de vida libre según la región, inoculando la cepa exótica antes de la inversión de esas condiciones. En la provincia de Corrientes, prácticamente todo el año es favorable al desarrollo y dispersión de larvas, por lo que se consideró necesario un largo período de tratamientos previos.

El monepantel actúa como agonista sobre receptores colinérgicos específicos de los nematodos (Hco-MPTL-1, en la subunidad ACR-23 del grupo específico DEG-3) (Kaminsky et al., 2008). Produce una hipercontracción de los músculos de la pared corporal del helminto, que culmina con una parálisis espástica y muerte. No presenta resistencia cruzada con otros grupos químicos. Su espectro es reducido a adultos y formas juveniles de nematodos del tracto digestivo (no afecta nematodos pulmonares, cestodos, trematodos, ni ectoparásitos, y la eficacia frente a Trichuris ovis es menor (75,2%). En cuanto a la farmacodinamia, tras la administración oral, se absorbe a sangre (biodisponibilidad del 30%), alcanza la CMAX a las 24 hs, con niveles aún eficaces a las 48 hs, eliminándose rápidamente, el 90% en 14 días (80% en heces y 10% en orina). Carece de efecto residual. Se metaboliza principalmente a sulfona (con actividad antihelmíntica). Los residuos se encuentran fundamentalmente en grasa e hígado. Esta indicado exclusivamente para ovinos y caprinos (no bovinos), con eficacia frente a cepas resistentes a otras drogas. (Steffan et al., 2011 a, b).

Pese a ser una molécula reciente, la primera del grupo, se han reportado casos de resistencia en Nueva Zelanda en 2013 (frente a Teladorsagia circumcincta y Trichostrongylus colubriformis) (Scott et al., 2013), Uruguay (frente a Haemonchus contortus) (Mederos et. al., 2014), Países Bajos (Van den Brom et. al., 2015), Brasil (Cintra et al. 2015) y Australia (Sales et al., 2016).

Materiales y métodos
El trabajo se realizó en un establecimiento comercial de 436 Has. del Dto. De Curuzú Cuatiá, sur de Corrientes, con 480 ovinos y 250 bovinos sobre una base forrajera de pastizales naturales de la región. Se estableció un protocolo de seguimiento mensual desde enero 2013 con el tratamiento en cualquier categoría de la majada, cuando los recuentos de huevos superaron los 200 HPG, lo que llevó a 4 y 5 dosificaciones a ovejas y borregas de reposición respectivamente durante el primer semestre. La incipiente falta de eficacia en un tratamiento de primavera, atribuida tempranamente a errores operativos, derivó en una fuerte sospecha de resistencia, debido a una mas evidente falla en diciembre. Por lo que se suspendió el trabajo de base, se realizó un test de reducción de conteo de huevos (TRCH) y una prueba de eficacia controlada por necropsia (TEC) de animales tratados y controles.

Se desparasitaron las borregas de recría (6-8 meses y 25-30 kg PV), en febrero con derquantel (2 mg/kg PV) más abamectina (0,2 mg/kg PV) – (Startect -Zoetis®), comprobándose su eficacia (HPG 0 en todos los animales 7 días postratamiento). Luego, se dejó pastorear en los potreros habitualmente ocupados por lanares y mediante monitoreo por HPG periódico, se esperó una reinfección natural.

Cuando los recuentos de HPG alcanzaron los 1000 huevos, se seleccionaron 22 animales, 11 de los cuales se trataron con 2,5 mg/kg PV de monepantel (Grupo Tratado – GT) y otros 11, se dejaron como control sin tratar (Grupo Control – GC). Al 6^to día se compararon los HPG, aplicando la fórmula de Presidente et. al. (1985) y se sacrificaron 5 animales de cada grupo, siguiendo los procedimientos sugeridos por la WAAVP (Coles et. al., 2006). El valor estadístico de los resultados fue analizado por la prueba de Kruskal-Wallis.

Resultados
Los resultados de reducción del conteo de huevos se vuelcan en la Tabla 1. Los promedios de HPG iniciales fueron 1800 para el GC y 1671 para el GT (Valor-P=0,58). Los resultados luego del tratamiento fueron 1825 y 1058 HPG, en los grupos GC y GT respectivamente no presentando diferencias estadísticamente significativas (Valor-P=0,14). La reducción del conteo de huevos, considerando todos los géneros fue de 42% según la fórmula de Abbot (IC: 0-71) y similar para cada uno de los dos parásitos principales (42% para Haemonchus spp., y 41% para Trichostrongylus spp., aunque para este último la carga parasitaria en los coprocultivos no era muy elevada).

Tabla 1: Resultados del TRCH. Se observan los recuentos de HPG individuales previos al tratamiento (HPG pretto) y luego del mismo (HPG postto) para cada uno de los grupos (Grupo Control y Grupo Tratado).

En las necropsias (Tabla 2), se compararon los recuentos de cada parasito en el GT versus el GC, resultando una eficacia del 100% respecto de Cooperia punctata y Cooperia pectinata (Valor-P=0,00064). Para Haemonchus contortus fue de 11,25% (Valor-P=0,75) y para Trichostrongylus colubriformis la eficacia fue de 0,00% (Valor-P=0,91). Frente a Trichuris ovis la eficacia fue de 50% (Valor-P=0,88), pero con una carga de escasa representación en los animales de la prueba.
Tabla 2: Resultado de estudios de HPG y necropsias de los animales utilizados en el TEC. Se observan los recuentos de cada género y especie parasitaria para cada animal de cada grupo.

H.c.: Haemonchus contortus; C.punct.: Cooperia punctata; C.pect.: Cooperia pectinata; T.col.:Trichostrongylus colubriformis; T.ovis: Trichuris ovis.

Discusión y conclusión
Queda demostrado que el uso de monepantel en una secuencia relativamente corta de tratamientos consecutivos, es suficiente para desarrollar la resistencia. Tal como lo demostraron los trabajos en Australia con Teladorsagia circumcincta, en base a la inoculación de larvas provenientes de huevos sobrevivientes al tratamiento (Scott et. al., 2013), como en los ya varios casos de campo (Mederos et. al., 2015; Sales et. al., 2016). El supuesto de reducir la población en refugio de una cepa, basándose exclusivamente en dosificaciones antiparasitarias debe reconsiderarse, o complementarse con otras medidas de manejo si se dispone de una sola droga. Este informe agrega a Argentina a la casuística de resistencia al monepantel y reafirma todo programa de manejo, que tienda a la reducción del número de tratamientos para el control de las trichostrongylosis en poblaciones de rumiantes.

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