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septiembre 2009

Estudio Serológico de Circovirus Porcino 2, Actinobacillus pleuropneumoniae, Virus de la Enfermedad de Aujeszky y Brucella en Cerdos.

Vet. Arg. – Vol.  XXVI –  Nº  257 – Septiembre 2009.
Eliana Guillemi, Fiorella Kotsias, María Mesplet,  Marcela Martínez Vivot, Eduardo Vicente Moras y  Nora Guida*.

Resumen.
El Circovirus porcino 2 (CVP2) es considerado un importante patógeno emergente en la producción porcina. Se lo ha asociado con diferentes síndromes y enfermedades de los cerdos, como ser el Síndrome de Dermatitis y Nefropatía Porcino (SDNP) y el Síndrome Multisistémico de Adelgazamiento Post Destete (SMAP). Se han encontrado otros agentes asociados al CVP2, tales como el virus de la Enfermedad de Aujeszky (VEA), Parvovirus porcino (PVP), Virus del Síndrome Respiratorio y Reproductivo Porcino (VSRRP) y Actinobacillus pleuropneumoniae (App). Su rol en la patogénesis de estas enfermedades aún no ha sido establecido y no se ha encontrado información acerca del estatus serológico para el CVP2 en Argentina.

El objetivo de este trabajo fue realizar el estudio anatomopatológico de lesiones compatibles con los síndromes producidos por el CVP2 en animales de faena y evaluar la presencia de anticuerpos contra CVP2, VEA, App y Brucella a partir de 92 sueros provenientes de animales del mismo establecimiento utilizando para ello técnicas de ELISA,  aglutinación en placa (BPA) y aglutinación lenta en tubo (SAT y 2-Me)

Los resultados anatomo e histopatológicos fueron compatibles con el diagnóstico de SDNP. Para CVP2 hemos encontrado un  88% de animales con un perfil de anticuerpos sugerente de infección no activa y un 2% de infección activa.

Con respecto a VEA y Brucella no se pudo establecer una relación con CVP2. El  alto porcentaje de animales hallados como seropositivos para App, al igual que para CVP2, sugieren una posible asociación entre estas dos enfermedades y deberían profundizarse los estudios al respecto.
Palabras clave: Porcino, Circovirus, Aujeszky, Parvovirus, Actinobacillus, Brucella

Serological Study of Porcine Circovirus 2, Actinobacillus Pleuropneumoniae, Aujeszky’S Disease Virus and BrucellaiIn Pigs.

Summary.
The porcine Circovirus type 2 (PCV2) is considered an important emerging pathogen in swine production. It has been associated to different syndromes and porcine diseases like the Porcine Dermatitis and Nephropathy Syndrome (PDNS) and the Post weaning Multisystemic Wasting Syndrome (PMWS). There have been found other infectious agents associated to PCV2, like the Aujeszky’s disease Virus (ADV), Porcine Parvovirus (PPV), Porcine Reproductive Respiratory Syndrome Virus (PRRSV) and Actinobacillus pleuropneumoniae (App). The interaction of the PCV2 in the pathogenesis of these diseases has not been determinated and information about the serological status for PCV2 in Argentina was not found.

The aim of this study was to perform an histopathological examination of the lesions compatible with PCV2 syndromes from slaughtering animals and to determinate the presence of antibodies against PCV2, ADV, PPV, App and Brucella in 92 sera samples from pigs of the same establishment by the ELISA test, plate agglutination test (BPA) and tube agglutination test (SAT and 2-ME).

The anatomical and histological lesions were compatible with PDNS diagnosis. We have found 88% of animals with an anti- PCV2 antibody profile that suggests a not active infection and a 2% of animals with an active infection profile.

Respect to ADV and Brucella, we could not determinate a relationship between them and PCV2. The high seroprevalence found in these animals for App, as it was found for PCV2, suggests a probable association between these two diseases and additional studies would be required to determine it.
Keywords:  Porcine, Circovirus, Aujeszky, Parvovirus, Actinobacillus, Brucella

*Cátedra de Enfermedades Infecciosas. Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad de Buenos Aires. Av. Chorroarín 280. (C1427CWO). Ciudad de Buenos Aires. Argentina.

Introducción.
El Circovirus porcino 2 (CVP2) es considerado un importante patógeno emergente en la producción porcina, tanto en Argentina como en el resto del mundo. Se lo ha asociado con diferentes síndromes y enfermedades de los cerdos, como por ejemplo el Síndrome de Dermatitis y Nefropatía Porcino(SDNP) y el Síndrome Multisistémico de Adelgazamiento Post Destete (SMAP) (1, 2). Además del CVP2, se han encontrado otros agentes de manera concomitante asociados a estos enfermedades, tales como el virus de la Enfermedad de Aujeszky (VEA), Parvovirus porcino (PVP), Virus del Síndrome Respiratorio y Reproductivo Porcino (VSRRP) y Actinobacillus pleuropneumoniae (App) (1, 2). El rol de estos agentes en la patogénesis de estos síndromes aún no ha sido establecido.

En nuestro país los primeros casos de SMAP fueron reportados por Sarradell y col. en el año 2001(cita?), mientras que el primer reporte de SDNP fue realizado por Perfumo y col. en el año 2003 (3).

El SDNP es una entidad clínico-patológica de baja morbilidad y alta letalidad, caracterizada por lesiones cutáneas y renales. La base patogénica de estas lesiones no está del todo dilucidada, no obstante se piensa que la vasculitis  necrotizante asociada al síndrome se debe a un mecanismo inmunomediado. Un estudio en cerdos afectados por SDNP demostró niveles de anticuerpos séricos contra CVP2 superiores a los de animales sanos, sugiriendo que este exceso de anticuerpos podría ser causa de una reacción de hipersensibilidad (4).

La inmunoglobulina M (IgM) es la primera en aparecer entre 3 y 10 días post-infección, y es detectable hasta los 50-60 días aproximadamente. La IgG se detecta entre los 12 y 15 días post-infección, supera el nivel de anticuerpos de IgM a los 30 días y permanece detectable en suero durante años (5).

Estudios serológicos realizados en otros países demostraron una amplia distribución de CVP2 en las poblaciones porcinas (2). No hemos encontrado información acerca del estatus serológico para la infección CVP2 en Argentina.

A partir del hallazgo, en animales faenados en un frigorífico, de lesiones macroscópicas compatibles con el síndrome de dermatitis y nefropatía, se decidió realizar el estudio histopatológico de las lesiones y evaluar la presencia de anticuerpos contra CVP-2 en sueros de animales provenientes del mismo establecimiento de faena. Además, los sueros se analizaron en busca de anticuerpos contra el VEA, App y Brucella.

Materiales y métodos.
Se estudiaron cortes histológicos de muestras de un animal con lesiones compatibles con SDNP proveniente de faena, por el método de rutina de inclusión en parafina y coloración con hematoxilina eosina.

Se recolectaron 92 sueros de cerdos durante la faena. De éstos, 31 correspondientes a la provincia de Buenos Aires, 31 a Córdoba y 30 a Santa Fé.

Se realizaron:

– ELISA de captura (Ingezim PCV, INGENASA) para detectar IgM e IgG contra CVP2.

– ELISA de bloqueo (Ingezim ADV, INGENASA) para detectar anticuerpos contra la glicoproteína gB del VEA.

– ELISA CHEKIT-App-ApxIV (Gottchalk, 1994) para detectar anticuerpos contra la toxina Apx IV de App.

– Prueba de aglutinación en placa con antígeno bufferado (BPA, Inst. Rosenbusch) como prueba tamiz y a los sueros reactantes positivos se les realizaron las pruebas de aglutinación lenta en tubo (SAT) y de aglutinación lenta en tubo con 2-Mercaptoetanol (2-ME) (Sanidad Ganadera). Estas pruebas se realizaron según la técnica aprobada por SENASA.

Resultados.
En el animal de faena se observaron lesiones en piel, con forma redondeada y a veces irregular, de color rojo a púrpura, formando placas de mayor tamaño, sobre todo en la zona perineal y extremidades posteriores (Figura 1). Los riñones se encontraron aumentados de tamaño, pálidos y con pequeños focos hemorrágicos. El estudio histopatológico reveló un infiltrado de tipo histiocitario con presencia de células mononucleares y células gigantes multinucleadas y moderada cantidad de eosinófilos.

En el estudio serológico de PCV-2 se obtuvieron 83 (90%) animales positivos a IgG, dos de los cuales fueron también positivas a IgM. El porcentaje de animales positivos para cada provincia fue del 93,3% para Santa Fé, 90,3% para Buenos Aires y de 87% para Córdoba. En la evaluación serológica para ADV, todas las muestras resultaron negativas. Tres sueros fueron positivos a la técnica de BPA. Sin embargo resultaron negativas para SAT y 2-ME. Los resultados del ELISA para App fueron 66% de positivos, 4% de dudosos y 30% de negativos. Para éste último se obtuvo el porcentaje de positivos por provincia, hallándose el mayor valor en Santa Fe (83,09%), luego en Buenos Aires (61,85%) y finalmente Córdoba (58,87%).

Conclusiones.
Los resultados anatomopatológicos e histopatológicos del animal estudiado fueron compatibles con el diagnóstico de SDNP, entidad que ya ha sido reportada en nuestro país.

Según la interpretación del test de ELISA utilizado para PCV2, hemos encontrado un 88% de los animales con un perfil de anticuerpos sugerente de infección no activa (positivos a IgG y negativos a IgM) y un 2% con infección activa (positivos tanto a IgM e IgG). Esto sugeriría que en las zonas de mayor densidad porcina de la Argentina los niveles de anticuerpos en la población son altos, al igual que lo reportado para otras regiones del mundo (5).

Respecto a los demás agentes estudiados, en el caso de VEA y Brucella, no se pudo establecer una relación con CVP2 ya que todas las muestras resultaron negativas para ambos. Aunque VSRRP y PVP se han encontrado asociados a CVP2 en otros países (1), no fueron incluidos en este estudio dado que el primero no está presente en nuestro país, mientras que la seroprevalencia para PVP, de acuerdo a estudios previos realizados en la Cátedra de Enfermedades Infecciosas (F.C.V., UBA), es cercana al 100% (6).

Las coinfecciones bacterianas también podrían tener un rol significativo en la patogénesis de estas enfermedades (1, 4). En este trabajo encontramos un alto porcentaje de animales seropositivos para App, al igual que para CVP2. A partir de estos resultados, y siendo App un patógeno emergente de alto impacto en nuestro medio, deberían profundizarse los estudios para determinar si existe una asociación con el desarrollo de síndromes asociados a PCV2.

Bibliografía.
1-CHAE, C. 2005. A review of porcine circonvirus 2-associated syndromes and diseases. Vet. J. 169:26-336.
2- SEGALÉS, J.: ALLAN, G. M.; DOMINGO, M. 2005. porcine circovurs diseases, Anim Health Res Rev.
:119-142.

3- PERFUMO, C.J.; CAPPUCCIO, J.A, MACHUCA, M.A.; QUIROGA, M.A.: MASSONE, A.E.; IDIART, J.R.; SCHWARTZ, K.; JANKE, B.H.; 2003. Estudios anatomopatológicos comparativos de las lesiones en los linfonódulos y bazo de cerdos con síndrome multisistémico de adelgazamiento postdestete y síndrome de dermatitis y nefropatía. VII Congreso Nacional de Producción Porcina. Argentina.
4-WELLENBERG, G.J.; STOCKHOFE-zURWIENDEN, N.; DE JONG, M.F.; BOERSMA, W.J.; ELBERS, A.R. 2004.
Excessive porcine circovirus type 2 antibody titres may trigger the development of porcine dermatitis and
nephropathy syndrome: a case-control study. Vet Microbiol. 99:203-214.
5- CARASOVA, P.; CELER, V.; TAKACOVA, K.; TRUNDOVA, M.; MOLINKOVA, D.; LOBOVA, D.; SMOLA, J. 2007. The levels of PCV2 specific antibodies and viremia in pigs. Res. Vet. Sci. 83:274-8.
6: FABIAN GRIMOLDI; LUIS JAUREGUI; NORA GUIDA; ANA MARIA BARBONI DE STELLA Y EDUARDO VICENTE MOR Serological prevalence of Porcine Parvovirus in Argentina. AS. XV IPVS Congress. Birmingham, Reino Unido. 5 al 9 de Julio.

Agradecimientos: Dr. G. Zielinski (INTA Marcos Juárez) Proyecto UBACyT 2004-2007, código V022.

 

Figura 1. Cuarto trasero porcino con  SDNP donde se observan lesiones en piel, de formas redondeadas e irregulares  color rojo - púrpura, con formación de placas. Gentileza del Dr. San Martín

Figura 1. Cuarto trasero porcino con SDNP donde se observan lesiones en piel, de formas redondeadas e irregulares color rojo - púrpura, con formación de placas. Gentileza del Dr. San Martín